技術概述
? ? ? 納米抗體即重鏈單域抗體VHH,具有高水溶性,高穩定性,易于工程化等優點。核心技術原理首先通過噬菌體展示技術建立一個超大容量的納米抗體基因文庫,再經過“吸附-洗滌-洗脫-擴增”的淘選環節,富集得到結合目標抗原的克隆,最后再對陽性單克隆測序分析等,篩選出針對特定靶點的納米抗體。
技術詳情
(1)豐富項目經驗:深耕行業多年,我們擁有涵蓋多物種、多靶點(包括困難靶點)的成熟項目經驗,能為您提供從方案設計到結果交付的全流程專業支持。
(2)領先技術平臺:依托先進的噬菌體展示文庫與高效淘選技術,我們能篩選出的納米抗體兼具納摩爾級超高親和力、卓越穩定性與優異的組織穿透性,并且品質經嚴格驗證。
(3)顯著成本優勢:憑借優化的工藝與蛋白表達系統,我們能在保證高質量成果的同時將開發周期大幅縮短,并顯著降低生產成本,為您大幅節省研發投入。
本案例是發表Cell Death Discovery期刊的一篇關于RBM47納米抗體的論文,研究人員使用包含RBM47 ISG化位點(K329)的12氨基酸肽段(CKECVSNYOKAA)作為抗原表位,從合成的納米抗體酵母表面展示庫中篩選出特異性結合RBM47的納米抗體(命名為?nbRBM47),再將nbRBM47與HERC5 E3連接酶的HECT結構域融合,構建成?nbRBM47-HECT?嵌合連接酶系統,實現了對RBM47蛋白的位點特異性ISG化精準操縱。功能驗證揭示,該納米抗體系統不僅能高效誘導RBM47發生ISG化,更能直接抑制關鍵免疫抑制因子TSC22D3的表達,從而在分子層面成功打通了“RBM47 ISG化下調TSC22D3”這條全新的免疫調控通路。

圖A: 嵌合E3連接酶 (nbRBM47-HECT) 的設計示意圖
圖B: nbRBM47在293T細胞中誘導了RBM47的ISG化
圖C、D: nbRBM47-HECT在A549細胞中抑制了TSC22D3的蛋白和mRNA表達
圖E:敲低RBM47消除了nbRBM47-HECT對誘導RBM47 ISG化的作用
圖F: nbRBM47-HECT通過在野生型MEFs中誘導RBM47的ISG化來抑制TSC22D3表達,但在R/R型MEFs中無效
圖G: nbRBM47-HECT對共轉染UBE1L、UBCH8和ISG15的質粒的Jurkat T淋巴細胞的作用
(資料來源:羅紹祥)
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